N-Methyl-(2S, 4R)-trans-4-hydroxy-L-proline, the major bioactive compound from Sideroxylon obtusifolium, attenuates pilocarpine-induced injury in cultured astrocytes

Glial cells have been implicated in temporal lobe epilepsy in humans and in its models. Astrocytes are lost in several brain regions after acute seizures induced by pilocarpine and may suffer hyperplasia at subsequent time points. This study investigated the effect of N-methyl-(2S,4R)-trans-4-hydroxy-L-proline (NMP) on astrocytes exposed to cytotoxic concentrations of pilocarpine. Astrocytes were incubated with pilocarpine (half maximal inhibitory concentration (IC50)=31.86 mM) for 24 h. Afterwards, they were treated with NMP at concentrations ranging from 3.12 to 100 μg/mL for 24 h. Cell viability was assessed by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Cytoplasmic reactive oxygen species (ROS) and mitochondrial transmembrane potential (ΔΨm) were analyzed by flow cytometry using 2',7'-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) and rhodamine-123 (Rho123), respectively. Expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and voltage-dependent anion channel-1 (VDAC-1) were measured by western blot. Pilocarpine significantly decreased cell viability and mitochondrial potential and increased ROS concentration significantly by 6.7 times compared to the control. NMP concentrations ≥25 µg/mL protected astrocytes against pilocarpine-induced injury in a concentration-dependent manner. Concomitantly, NMP reduced cytoplasmic ROS accumulation to 27.3, 24.8, and 12.3% in the groups treated with 25, 50, and 100 µg/mL NMP, respectively. NMP also protected mitochondria from pilocarpine-induced depolarization. These effects were associated with improvement of pilocarpine-induced GFAP and VDAC-1 overexpression, which are important biomarkers of astrocyte dysfunction. In conclusion, the improvement of ROS accumulation, VDAC-1 overexpression, and mitochondrial depolarization are possible mechanisms of the NMP protective action on reactive astrocytes.

Maturação in vitro de oócitos de cutias (Dasyprocta prymnolopha, Wagler 1831) seguida de fertilização in vitro e ativação partenogenética / In vitro maturation of agoutis (Dasyprocta prymnolopha) oocytes followed by in vitro fertilization and parthenogenetic activation

O objetivo foi avaliar protocolos de maturação in vitro (MIV) para oócitos de cutias, seguida de fertilização in vitro (FIV) e ativação partenogenética (AP). Os oócitos imaturos (CCOs) foram obtidos por fatiamento do ovário, após OSH, e submetidos a três grupos: MAT - 16 (16 horas de maturação), MAT - 20 (20 horas de maturação) e MAT - 24 (24 horas de maturação), em incubadora de cultivo a 38,8°C, com atmosfera de 5% de CO2 e 95% de umidade relativa. A maturação foi analisada pela presença do primeiro corpúsculo polar. Em seguida, os CCOs maduros foram submetidos à FIV, com período de coincubação dos CCOs e dos espermatozoides de 15h, a 38,8ºC e 5% de CO2, e AP com ionomicina. Os grupos de MIV foram analisados utilizando-se o teste qui-quadrado e, nos experimentos de FIV e AP, foram analisadas a taxa de clivagem e a proporção de desenvolvimento embrionário. A análise estatística foi realizada utilizando-se o programa SAS. Houve diferença significativa entre os grupos de maturação, tendo os grupos MAT - 20 e MAT - 24 apresentado maior porcentagem de oócitos maturados in vitro. As taxas de clivagem e de desenvolvimento embrionário foram de 8,6% e 2,9%, respectivamente, na FIV, e de 63,6% e 15,1%, na AP. Entretanto, nos dois casos, o embrião não passou do estágio de mórula.(AU)

The objective was to evaluate IVM protocols for agouti oocytes, followed by in vitro fertilization (IVF) and parthenogenetic activation (PA). The immature oocytes (CCOs) were obtained by slicing the ovary after OSH and submitted to three groups: MAT - 16 (16 hours maturation), MAT - 20 (20 hours maturation) and MAT - (24 hours maturation), in a culture incubator at 38.8°C, with an atmosphere of 5% CO2 and 95% relative humidity. The maturation was analyzed by the presence of the first polar corpuscle. Then, mature CCOs were submitted to IVF, with co-incubation period of CCOs and spermatozoa from 15h to 38.8°C and 5% of CO2, and PA with inomycin. The IVM groups were analyzed using the chi-square test and in the FIV and PA experiment the rate of cleavage and the rate of embryonic development were analyzed. Statistical analysis was performed using the SAS program. There was a significant difference between the maturation groups, and the MAT - 20 and MAT - 24 groups showed a higher percentage of matured oocytes in vitro. The rates of cleavage and embryonic development were 8.6% and 2.9%, respectively in FIV and 63.6% and 15.1% in PA. However, in both cases the embryo did not pass beyond the morula stage.(AU)

Immunophenotyping, plasticity tests and nanotagging of stem cells derived from adipose tissue of wild rodent agouti (Dasyprocta prymnolopha) / Imunofenotipagem, testes de plasticidade e marcação com nanocristais de céluas-tronco derivadas de tecido adiposo em cutias

There is a growing interest in the study of unspecialized mesenchymal stem cells, for there are still some discussions about their in vitro behavior. Regenerative medicine is a science undergoing improvement which develops treatments as cell therapy using somatic stem cells. In several studies, adipose tissue is presented as a source of multipotent adult cells that has several advantages over other tissue sources. This study aimed to characterize and evaluate the tagging of mesenchymal stem cells from the agoutis adipose tissue (Dasyprocta prymonolopha), with fluorescent intracytoplasmic nanocrystals. Fibroblast cells were observed, plastic adherent, with extended self-renewal, ability to form colonies, multipotency by differentiation into three lineages, population CD90 + and CD45 - expression, which issued high red fluorescence after the tagging with fluorescent nanocrystals by different paths and cryopreserved for future use. It is possible to conclude that mesenchymal stem cells from agouti adipose tissue have biological characteristics and in vitro behavior that demonstrate its potential for use in clinical tests.(AU)

Há um interesse crescente no estudo das células estaminais mesenquimais, não especializadas, pois ainda existem algumas discussões sobre seu comportamento in vitro. A medicina regenerativa é uma ciência em fase de crescimento que desenvolve tratamentos como terapia celular utilizando células estaminais somáticas. Em vários estudos, o tecido adiposo é apresentado como uma fonte de células adultas multipotentes que tem várias vantagens em relação a outras fontes de tecido. Este estudo teve como objetivo caracterizar e avaliar a marcação de células estaminais mesenquimais do tecido adiposo de cutias (Dasyprocta prymnolopha) com nanocristais intracitoplasmáticos fluorescentes. Observaram-se células fibroblásticas, aderentes ao plástico, com autorrenovação prolongada, capacidade de formar colônias, diferenciação em três linhagens, população CD90 + e expressão CD45, que emitiram alta fluorescência vermelha após a marcação com nanocristais fluorescentes por diferentes vias, e criopreservadas para uso futuro. É possível concluir que as células estaminais mesenquimais do tecido adiposo de cutias têm características biológicas e comportamentos in vitro que demonstram seu potencial para uso em testes clínicos.(AU)

Modulation of the prostaglandin-endoperoxide synthase 2 gene expression by variant haplotypes: influence of the 3'-untranslated region

The inducible inflammatory enzyme cycloxigenase-2 is up-regulated in cancer, and favors tumor progression. Cycloxigenase-2 is encoded by the prostaglandin-endoperoxide synthase 2 (PTGS2) gene, which presents sequence variations in the promoter region (PR) and in the 3′-untranslated region (3′-UTR). Different PR (rs689465, rs689466, rs20417) and 3′-UTR (rs5275) variants were generated by site-directed mutagenesis, and combined in haplotypes to access expression levels using a reporter system (luciferase) in human cells (MCF-7 and HEK293FT). Luciferase activity did not differ significantly among PTGS2 PR constructs, except for pAAC (containing variant allele rs20417 C), with 40% less activity than pAAG (wild-type sequence) in MCF-7 cells (P<0.01). Despite the lack of individual significant differences, PTGS2 PR constructs enclosing rs689466 G (pAGG and pAGC) showed an approximate two-fold increase in luciferase activity when compared to those containing rs689466 A (pAAG, pGAC, pAAC and pGAG) in both cell lines (P<0.001 for MCF-7 and P=0.03 for HEK293FT). The effect of PTGS2 3′-UTR sequences varied between MCF-7 and HEK293FT: MCF-7 cells showed significant reduction (40-60%) in luciferase activity (at least P<0.01), whereas HEK293FT cells showed more diverse results, with an average 2-fold increase when combined constructs (PR and 3′-UTR) were compared to respective parental PR sequences. The contribution of 3′-UTR variant (rs5275) was not consistent in either cell line. Despite the modulation of the 3′-UTR, with variable effects of rs5275, the enhancing transcriptional effect of rs689466 G was still detectable (P<0.0001 in MCF-7 or P=0.03 in HEK293FT cells).

Tropical forages: morphoanatomy of plants grown in areas with the death of pasture syndrome / Forrageiras tropicais: anatomia e morfometria de plantas cultivadas em áreas com síndrome da morte de pastagens

Abstract Roots and leaves of Panicum maximum Tanzânia, Mombaça and Massai; Urochloa brizantha Piatã, Marandu and Xaraés; Urochloa humidicola Llanero; Urochloa ruziziensis Ruzizienses; Urochloa hybrida Mulato II and Cynodon nlemfuensis Estrela-roxa were analyzed, seeking to identify characters for better adaptation to the environment that may interfere with digestibility of tissue from the point of view of the rumen in cattle. Were planted ten cultivars in a completely randomized blocks with three repetitions. Was collected vegetative material, which histological slides were prepared from middle third of the sections of roots and leaves. Were observed differences (p>0.05) in the roots: higher volume of epidermal cells (28.62 µm) and overall diameter (1926.41 µm) of Llanero; thicker vascular cylinder (975.09 µm) and more protoxylem (42.25) in Estrela-roxa and occurrence of aerenchyma in cultivars Piatã, Mulato II, Xaraés, Massai, Llanero and Estrela-roxa; Were found higher proportions of bulliform cells in the leaves (121.07 µm) and thicker leaf mesophyll in U. humidicola Llanero (263.63 µm); higher proportion of sclerenchyma fibers in Xaraés and Marandu; lower results for amount of fibers in P. maximum Massai. We conclude that the cultivars Estrela-roxa, Llanero and Massai have greater adaptability to the environment and better nutritional quality.

Resumo Foram analisadas raízes e folhas de Panicum maximum Tanzânia, Mombaça e Massai; Urochloa brizantha Piatã, Marandu e Xaraés; Urochloa humidicola Llanero; Urochloa ruziziensis Ruzizienses; Urochloa hybrida Mulato II e Cynodon nlemfuensis Estrela-roxa, procurando identificar caracteres relacionados à melhor adaptação ao ambiente e à qualidade nutritiva das forrageiras. As dez cultivares foram semeadas em blocos inteiramente casualizados com três repetições. Após estabelecidas foi coletado material vegetativo, do qual lâminas histológicas foram confeccionadas a partir de secções do terço médio de raízes e folhas. Foram observadas diferenças significativas (p>0,05) nas raízes: maior volume de células epidérmicas (28,62 µm) e diâmetro total (1926,41 µm) de Llanero; em Estrela-roxa maior espessura do cilindro vascular (975,09 µm) e número maior de protoxilemas (42,25) e formação de aerênquimas nas cultivares Piatã, Mulato II, Xaraés, Massai, Llanero, e Estrela-roxa; Nas folhas, foram constatadas maiores proporções de células buliformes (121,07 µm) e mesofilo foliar mais espesso (263,63 µm) em Llanero; em Xaraés e Marandu maiores proporções de fibras esclerenquimáticas; em Massai menores resultados para quantidade de fibras. Conclui-se que as cultivares Estrela-roxa, Llanero e Massai apresentam maior adaptabilidade ao ambiente e melhor qualidade nutritiva.

Efeito de vitaminas adicionadas ao diluente ACP-104 sobre a qualidade do sêmen criopreservado de carpa comum (Cyprinus carpio) / Effect of vitamins added to the ACP-104 extender on the quality of cryopreserved semen of common carp (Cyprinus carpio)

O objetivo da presente pesquisa foi alcançado com a divisão da pesquisa em dois experimentos: (1) aperfeiçoar o protocolo de congelação utilizando água de coco em pó (ACP-104) como diluente para a criopreservação seminal de carpa comum; (2) avaliar o efeito da suplementação das vitaminas C (ácido ascórbico) ou E (α-tocoferol) sobre os melhores diluidores testados no experimento 1 na qualidade do sêmen pós-descongelado da espécie. Para o experimento 1, foram formados oito pools de sêmen, provenientes de 14 machos selecionados. As amostras seminais coletadas foram avaliadas quanto à motilidade total, à velocidade, ao percentual de espermatozoides normais e à vitalidade espermática antes e depois da criopreservação seminal. Esta foi realizada em meio ACP-104 acrescido de dimetilsulfóxido (DMSO), ou etilenoglicol (EG), ou glicerol, ou metanol, todos à concentração de 10%, diluídos em 1:3 (sêmen:diluidor). As amostras foram, então, congeladas em vapor de nitrogênio líquido em dry shipper e estocadas em nitrogênio líquido (-196°C). Para o experimento 2, foram formados oito pools provenientes da coleta de sêmen de 15 machos. As amostras seminais foram avaliadas seguindo as mesmas análises do experimento 1, acrescentando-se a duração da motilidade total. A criopreservação seminal utilizou-se do meio ACP-104 acrescido de DMSO ou EG, suplementado ou não com vitamina C ou E. Os melhores resultados encontrados no experimento 1 foram obtidos com o DMSO e o EG. Estes não diferiram significativamente entre si para a motilidade total (24% e 28%; P>0,05) e a normalidade espermática (32% e 26%; P>0,05), respectivamente. Para o experimento 2, o EG suplementado com vitamina E produziu significativamente resultados superiores de motilidade total, normalidade espermática e duração da motilidade em relação ao DMSO, concluindo-se que o EG deve ser, portanto, o crioprotetor de escolha a ser utilizado com o ACP-104 suplementado ou não com vitamina E.(AU)

The objective was achieved by dividing the research into two experiments: (1) improving the freezing protocol using powdered coconut water (ACP-104) as a diluent for the cryopreservation seminal of common carp; (2) evaluating the effect of supplementation of vitamins C (ascorbic acid) or vitamin E (α-tocoferol) with the best extenders tested in experiment 1 on the quality of post-thawed. For experiment 1, semen pools from 14 selected males were formed. Seminal samples were evaluated for total motility, velocity, percentage of normal sperm and sperm vitality before and after the seminal cryopreservation. This was done in ACP-104 extender plus dimethyl sulfoxide (DMSO), or ethylene glycol (EG), or glycerol or methanol all at concentration 10% diluted in 1:3 (semen:extender). The samples were frozen in vapors of nitrogen into dry shippers and stored in liquid nitrogen (-196 °C). For experiment 2, eight pools were formed from the 15 males. The semen samples were evaluated following the same analysis of experiment 1 adding duration of total motility. The sperm cryopreservation was performed in extenders ACP-104 plus DMSO or EG supplemented or not with vitamin C or E. The best results found in Experiment 1 were obtained with DMSO and EG. They do not differ significantly for total motility (24% and 28%; P>0.05) and normal sperm (32% and 26%; P>0.05) respectively. For experiment 2, EG supplemented with vitamin E, produced significantly better results overall motility, sperm normality and duration of motility relative to DMSO. In conclusion, EG should be the cryoprotectant of choice for use with the ACP-104 supplemented or not with vitamin E.(AU)

Morfologia e dinâmica testicular em cutias (Dasyprocta prymnolopha) adultas / Testicular morphology and dynamic in adult agoutis (Dasyprocta prymnolopha)

Este trabalho objetivou apresentar a caracterização da morfologia do testículo de cutia (Dasyproctaprymnolopha) macho, com o intuito de colaborar com o conhecimento da morfofisiologia reprodutiva da espécie. Foram utilizados testículos de 47 animais, com idade entre um e dois anos, pesos homogêneos (2,08 ± 0,23kg), oriundos do Núcleo de Estudos e Preservação de Animais Silvestres do Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Piauí. As estruturas foram dissecadas, descritas, e fragmentos foram processados para a microscopia de luz, sendo, posteriormente avaliada a atividade gonadal. Observou-se que os testículos são órgãos elipsoides alongados, podendo ser encontrados na região inguinal ou na cavidade abdominal, não apresentando um escroto bem delimitado. Verificou-se também parênquima com característica histológica padrão para o órgão em mamíferos, com a identificação de oito tipos de associações celulares, caracterizando os estádios do ciclo do epitélio seminífero, com menor e maior frequência dos estádios 3 e 5, respectivamente.(AU)

This study meant to characterize the morphology of the testicle from (Dasyprocta prymnolopha) agouti males, in order to collaborate with the knowledge of reproductive morphophysiology of the specie. Testicles were used from 47 animals aged between 1 and 2 years, homogeneous weight (2.08±0.23kg), coming from the Centre for the Study and Conservation of Wild Animals of Agricultural Sciences Center of the Federal University of Piauí. The structures were dissected, described and fragments were processed for light microscopy, and, subsequently, gonadal activity was evaluated. Testes were observed to be elongated ellipsoidal bodies that can be found in the groin or in the abdominal cavity, not having a clearly defined scrotum. We also could see parenchymal with standard histological characteristic for the mammalian body, with the identification of eight types of cell associations, characterized epithelium Seminiferous stages of the cycle, with lower and higher frequency of stages 3 and 5, respectively.(AU)

Salinity does not alter the effectiveness of menthol as an anesthetic and sedative during the handling and transport of juvenile fat snook (Centropomus parallelus) / Salinidade não altera a eficácia de mentol como um anestésico e sedativo durante a manipulação e transporte de juvenis de robalo peva (Centropomus parallelus)

Abstract The effectiveness of menthol as anesthetic and sedative for fat snook (Centropomus parallelus) was tested at different salinities. In the first experiment, the fish were exposed to different concentrations of menthol (25, 37 and 50 mg L–1) in water at different salinities (0, 17 and 36 ppt). In the second experiment, the fish were transported for 10 hours in water with menthol at concentrations of 0, 3.7 and 7.4 mg L–1 under different salinities. Na+ and K+ ions from fish body and water were analyzed after transport. The optimal concentrations of menthol for a short handling period and surgical induction was 37 and 50 mg L–1, respectively, and these values were independent of salinity. After transport, neither mortality nor significant changes in ammonia or dissolved oxygen were observed between treatments at the different salinities. The nitrite levels were lower in freshwater than in brackish and saltwater, but did not change with mentol. The total body levels of Na+ increased with the salinity increase. Menthol is an effective anesthetic for handling of juvenile fat snook at different salinities. Menthol did not influence the measured water parameters and body ions, and it is not necessary for the transport of fat snook.

Resumo A eficácia de mentol como anestésico e sedativo para o robalo peva (Centropomus parallelus) foi testada em diferentes salinidades. No primeiro experimento, os peixes foram expostos a diferentes concentrações de mentol (25, 37 e 50 mg L–1) em diferentes salinidades na água (0, 17 e 36 ppt). No segundo experimento, os peixes foram transportados por 10 horas em água com mentol nas concentrações de 0, 3,7 e 7,4 mg L–1 sob diferentes salinidades. O Na+ e K+ do corpo do peixe e a água foram analisados após o transporte. As concentrações ideais de mentol para um período curto de manipulação e indução cirúrgica foi 37 e 50 mg/L, respectivamente, sendo esses valores independentes da salinidade da água. Após o transporte, não foi verificado mortalidades e nem alterações significativas nos níveis da amônia e oxigênio dissolvido entre os tratamentos para as diferentes salinidades. Os níveis de nitrito foram mais baixos em água doce do que em água salobra e água salgada, mas não se alterou com o mentol. Os níveis corporais de Na+ e K+ aumentaram com o aumento da salinidade. Mentol é um eficaz anestésico para manipulação de robalo peva juvenil em diferentes salinidades. Mentol não influenciou os parâmetros de medição de água e íons do corpo, e não é necessário para o transporte de robalo peva.

Cinética e morfologia de espermatozoides de carpa comum criopreservados em água de coco em pó acp-104 / Kinetics and morphology of common carp sperm cryopreserved in powdered coconut water acp-104

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes taxas de diluição seminal sobre a motilidade, velocidade e presença de anormalidades espermáticas no sêmen descongelado de carpa comum (Cyprinus carpio). Utilizaram-se 20 machos sexualmente maduros, pertencentes ao Departamento Nacional de Obras Contra as Secas (DNOCS). A partir do sêmen coletado, foi formado um total de nove pools. O sêmen de cada pool foi avaliado quanto à motilidade, velocidade e morfologia espermática antes e depois da criopreservação. A criopreservação seminal foi realizada em meio ACP-104 + DMSO 10% diluído em 1:1 ou 1:3 (sêmen:diluidor). As amostras foram envasadas em palhetas de 0,25mL, congeladas em vapor de nitrogênio líquido (caixa de poliestireno) e estocadas em nitrogênio líquido (-196 °C). Não houve diferença significativa (P>0,05) entre as taxas de diluições sobre os parâmetros cinéticos e morfológicos de sêmen descongelado de carpa comum. Entretanto, esses parâmetros apresentaram diferença significativa (P<0,05) em relação ao sêmen fresco (controle). Baixos valores de velocidade foram registrados no sêmen descongelado (VCL 42,6-46,5μm/s; VSL 33,2-37,1μm/s; VAP 38,9-43,2μm/s); contudo, observaram-se motilidades acima de 59% (59,8-67,8%) e baixos índices de anormalidades espermáticas (19,3-19,5%), sugerindo que o ACP pode ser usado como um meio favorável à criopreservação do sêmen de carpa comum em qualquer uma das taxas de diluição testadas.

The aim of this study was to determine the effects of various dilution ratios on thaw sperm motility, velocity and presence of spermatic abnormalities in the common carp. 20 males with three years of age, raised at the Departamento Nacional de Obras Contra as Secas (DNOCS) were used. From the collected semen a total of nine pools were formed. The semen from each pool was evaluated for motility, velocity and spermatic morphology before and after cryopreservation. The sperm cryopreservation was performed in medium ACP-104 + DMSO 10% diluted in 1:1 or 1:3 (sperm:extender). The samples were loaded into 0.25mL straws, frozen in liquid nitrogen vapor (Styrofoam) and stored in liquid nitrogen (-196 °C). There was no significant difference (P>0.05) between the ratios of dilution on the kinetic and morphological parameters of thawed semen from common carp. However, these parameters were significantly different (P<0.05) compared to fresh semen (control). Low velocity values were recorded in thawed semen (VCL 42.6-46.5μm/s; VSL 33.2-37.1μm/s; VAP 38.9-43.2μm/s), however, observed motility above 59% (59.8-67.8%), and low levels of spermatic abnormalities (19.3-19.5%) suggested that the ACP-104 can be used as a suitable medium for cryopreservation of common carp semen in any of the tested dilution ratios.

TSST-1, enterotoxin and bacteriocin-like substance production by Staphylococcus aureus isolated from foods / TSST-1, enterotoxinas e substâncias tipo bacteriocina produzidas por Staphylococcus aureus isolados de alimentos

The production of Toxic Shock Syndrome Toxin-1 (TSST-1), enterotoxins and bacteriocin-like substances was evaluated in 95 strains of Staphylococcus aureus recovered from raw bovine milk (n=31) and from food samples involved in staphylococcal food poisoning (n=64). Enterotoxigenicity tests with the membrane over agar associated to optimal sensibility plate assays were performed and showed that 96.77% of strains recovered from milk and 95.31% from food samples produced enterotoxins A, B, C, D or TSST-1. Reference strains S. epidermidis, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus casei, Pseudomonas aeruginosa, S. aureus, Salmonella Typhimurium, Escherichia coli, Enterococcus faecalis and Bacteroides fragilis were used as indicator bacteria in the antagonistic assays, the first five being sensitive to antagonistic substances. Brain heart infusion agar, in pH values ranging from 5.0 to 7.0 in aerobic atmosphere showed to be the optimum condition for antagonistic activity as evaluated with the best producer strains against the most sensitive indicator bacterium, L. monocytogenes. Sensitivity to enzymes confirmed the proteinaceous nature of these substances. Neither bacteriophage activity nor fatty acids were detected and the antagonistic activity was not due to residual chloroform. Results did not establish a positive correlation between the bacteriocinogenic profile and toxigenicity in the tested S. aureus strains.

Avaliou-se a produção de toxina-1 da síndrome do choque tóxico (TSST-1), enterotoxinas e substâncias antagonistas tipo bacteriocina em 95 amostras de Staphylococcus aureus recuperadas de leite bovino in natura (n=31) e de alimentos envolvidos em surto de intoxicação (n=64). Testes de enterotoxigenicidade pelo método da membrana sobre ágar, associado à técnica da sensibilidade ótima em placa, revelaram que 96,77% das amostras do leite e 95,31% daquelas dos alimentos produziram enterotoxinas estafilocócicas tipos A, B, C, D ou TSST-1. Nos ensaios de antagonismo, foram utilizadas como reveladoras amostras de referência de S. epidermidis, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus casei, Pseudomonas aeruginosa, S. aureus, Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Enterococcus faecalis e Bacteroides fragilis, sendo as cinco primeiras sensíveis às substâncias produzidas. As condições ótimas para a atividade antagonista, avaliadas com as melhores produtoras contra a indicadora mais sensível, L. monocytogenes, foram observadas em aerobiose, em ágar infuso de cérebro-coração, nos valores de pH entre 5,0 e 7,0. A sensibilidade a enzimas confirmou a natureza proteica destas substâncias. Não foram detectadas atividades de bacteriófagos nem de ácidos graxos, e a atividade antagonista não foi devido ao clorofórmio residual. Os resultados não mostraram correlação entre o perfil bacteriocinogênico e a toxigenicidade nas amostras de Staphylococcus testadas.

Identification and in vitro production of Lactobacillus antagonists from women with or without bacterial vaginosis

Lactobacilli isolated from the vaginal tract of women with and without bacterial vaginosis (BV) were identified and characterized for the production of antagonists. Bacterial samples were isolated from healthy women (N = 16), from patients with clinical complaints but without BV (N = 30), and from patients with BV (N = 32). Identification was performed using amplified ribosomal DNA restriction analysis. Production of antagonistic compounds was evaluated by the double-layer diffusion technique using Gram-positive (N = 9) and Gram-negative bacteria (N = 6) as well as yeast (N = 5) as indicator strains. Of a total of 147 isolates, 133 were identified as pertaining to the genus Lactobacillus. Lactobacillus crispatus was the species most frequently recovered, followed by L. johnsonii and L. jensenii. Statistical analysis showed that L. crispatus was more frequent in individuals without BV (P < 0.05). A higher production of antagonists was noted in L. crispatus isolates from healthy women (P < 0.05). More acidic local pH and higher H2O2 production by isolated lactobacilli from healthy women suggest these mechanisms as the possible cause of this antagonism. In conclusion, a significant correlation was detected between the presence and antagonistic properties of certain species of Lactobacillus and the clinical status of the patients.

Determinação do perfil protéico da membrana externa da Leptospira interrogans sorovariedade Hardjoprajitno / Protein profile of the outer membrane of Leptospira interrogans serovar Hardjoprajitno

Estudou-se o perfil das proteínas da membrana externa (PME) da Leptospira interrogans sorovariedade Hardjoprajitno por meio da eletroforese bidimensional. Foram utilizadas técnicas de extração das PME com Triton x114 e precipitação com acetona. Os géis foram corados com nitrato de prata e as imagens analisadas para determinação da massa molecular das proteínas detectadas. Foram visualizadas 35 bandas protéicas, sendo que cinco delas se destacaram por estarem em maior quantidade: 22,54KDa (LipL22), 30/26KDa (LipL32), 34,41KDa (PME34), 42,75KDa (LipL41) e 58,59KDa (LipL63).

The protein profile of the outer membrane of Leptospira interrogans serovar Hardjoprajitno was determined by two-dimensional gel electrophoresis. The outer membrane was extracted with Triton x 114 and the proteins were precipitated with acetone. The images were analyzed for the determination of the molecular weight of the detected proteins. Thirty-five spots for the proteins that are predominant in the outer membrane of this Leptospira were observed and five proteins were found in higher quantities: 22.54KDa (LipL22), 30/26KDa (LipL32), 34.41KDa (PME34) (2), 42.75KDa (LipL41), and 58.59KDa (LipL63).

Hemograma e proteinograma de cutias (Dasyprocta sp. ) hígidas, criadas em cativeiro: influência do sexo e da idade / Haemogram and proteinogram of healthy agouti (Dasyprocta sp. ) raised in captivity: influence of gender and age

Determinaram-se os perfis do hemograma e do proteinograma de 24 cutias (Dasyprocta sp.) saudáveis, criadas em cativeiro, e avaliaram-se a influência de sexo e de idade e a interação sexo-idade. O delineamento foi inteiramente ao acaso em arranjo fatorial 2 x 4 (dois sexos e quatro faixas etárias), com três repetições. Os valores do hemograma e do proteinograma foram: leucócitos totais: 7,24±2,52 (x10³/µl), basófilos: 0,11±0,2 (x10³/µl), eosinófilos: 0,32±0,2 (x10³/µl), segmentados: 2,5±1,22 (x10³/µl), linfócitos: 3,58±1,52 (x10³/µl), monócitos: 0,76±0,47 (x10³/µl), hemácias: 6,51±0,83 (x10(6)/µl), hematócrito: 43,58±3,41 por cento, hemoglobina: 12,71±1,04g/dl, volume corpuscular médio: 67,61±7,52ml, concentração de hemoglobina corpuscular média: 29,19±1,61 por cento, plaquetas: 150,08±63,39 (x10³/ml), proteínas totais: 6,04±1,77g/dl, albumina: 2,07±0,79g/dl e globulinas: 3,97±1,54g/dl. Os parâmetros relativos à série vermelha e ao proteinograma não diferiram quanto ao sexo ou idade, e não houve interação sexo-idade. Os valores de linfócitos foram mais baixos entre os animais mais velhos.

The profiles of hemogram and proteinogram of healthy agouti (Dasyprocta sp.) grown in captivity, in Piauí State, Brazil, were determined, as well as the influence of gender and age factors and the relationship between sex-age them. A completely randomized design was used in a factorial arrange 2x4, two genders and four ages, totaling 24 animals. The mean values of the hemogram were: erythrocytes = 6.51±0.83 (x10(6)); hematocrit = 43.58±3,41 percent; hemoglobin = 12.71±1,04g/dl; mean corpuscular volume = 64.61±7.52μl; mean corpuscular hemoglobin concentration = 29.19±1,61 percent; platelets= 150.08±63.39 (x10³/μl); white blood cells = 7.24±2.52 (x10³/μl); basophils = 0.11±0,2 (x10³/μl); eosinophils = 0,32±0,2 (x10³/μl); neutrophils = 2.5±1,22 (x10³/μl); lymphocytes = 3.58±1.52 (x10³/μl); and monocytes = 0.76±0.47 (x10³/μl). The mean values of the proteinogram were: total serum proteins = 6.04±1.77g/dl; albumin = 2.07±0.79g/dl and globulin = 3.97±1.54g/dl. Neither gender nor age influenced the results of the studied parameters. Association between gender and age was not verified. The values of lymphocytes were lower in older animals.

Níveis iônicos e enzimáticos de cutias (Dasyprocta sp.) hígidas, criadas em cativeiro, influência do sexo e da idade / Ion and enzymatic levels of healthy agouti (Dasyprocta sp.) raised in captivit. Influence of gender and age

Determinou-se o perfil do ionograma e enzimas hepáticas de cutias (Dasyprocta sp.) saudáveis, criadas em cativeiro, como também se avaliou a influência de sexo, idade e interação sexo-idade. Foi adotado um delineamento inteiramente ao acaso, em arranjo fatorial 2 x 4 (dois sexos e quatro faixas etárias), com três repetições, totalizando 24 cutias. Foram determinados os valores para o cálcio (Ca), fósforo (P), cloretos (Cl), aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), fosfatase alcalina (FA) e gama-glutamiltransferase (GGT). Os valores médios obtidos foram: Ca= 7,62+2,59mg/dl; P= 3,91+1,41mg/dl; Cl= 58,63+16,45mg/dl; AST= 119,54+79,35UI/ml; ALT= 28,08+15,53UI/ml; FA= 26,95+14,01UI/ml e GGT= 25,34+19,44UI/ml. O valor de P foi maior nas fêmeas e da FA nos machos. Os níveis de FA diminuíram com o aumento da idade.

This research studied the profile of the ionogram and hepatic enzymes of healthy agoutis (Dasyprocta sp.) raised in captivity as well as evaluated the influence of gender, age and interaction gender-age. It was used a completely randomized design, in a factorial arrangement of 2 x 4 (two genders and four age groups), with three repetitions, totaling 24 agoutis. The values were determined for calcium (Ca), phosphorus (P), chlorides (Cl), aspartate aminotransaminase (AST), alanine aminotransaminase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), and gamma-glutamyltransferase (GGT). The mean values were: Ca= 7.62±2.59mg/dl; P= 3.91±1.41mg/dl; Cl= 58.63±16,45mg/dl; AST= 119.54±79.35UI/ml; ALT= 28.08±15.53UI/ml; ALP= 26.95±14.01UI/ml, and GGT= 25.34±19.44UI/ml. The value of P was larger in females and ALP in males. As the age increased, levels of ALP decreased.

Estudo da utilização de antimicrobianos e outros fármacos para distúrbios do trato respiratório em pecientes pediátricos hospitalizados / The study of medication in respiratory and antimicrobian treatment in hospitalized pediatrics patients

O tratamento das doenças respiratórias requerem a utilização de antibióticos, corticosteróides e broncodilatadores. Todavia é desejável que, na pediatria, estas medicações sejam restritas e se utilize uma via de administração confortável. O objetivo deste trabalho foi avaliar a utilização dos medicamentos do trato respiratório e antimicrobianos em pacientes pediátricos hospitalizados, por meio da análise de seus prontuários. Os dados foram coletados durante 120 dias, observando-se os medicamentos prescritos, as doses, as vias de administração e as medidas não farmacológicas prescritas. O critério de inclusão na pesquisa foi estar o paciente internado na pediatria, ter na prescrição um antimicrobiano ou medicamento para o trato respiratório. As análises dos 136 prontuários mostrou que 97,06% continham um antimicrobiano, sendo o mais prescrito ampicilina e o fenoterol e ipratrópio como broncodilatadores. Destaca-se que 21,35% das prescrições apresentaram dosagem abaixo do mínimo e em, 21,89% acima do máximo. Embora em 93,75% dos casos tenha havido prescrição de dieta por via oral, 70,59% dos pacientes tiveram prescrição de medicação por via intravenosa. Esses dados revelam o uso de doses subterapêuticas, prescrição excessiva de antimicrobianos e o uso freqüente da via parenteral que encarecem o tratamento, predispõem ao aparecimento de efeitos indesejáveis como superinfecção, prolongando o tempo de permanência no hospital

External skeletal fixation in dogs: clinical and microbiological avaluation

Eleven dogs, of both sexes, average weight of 12kg, with ages ranging from two to five years were used with the objective of evaluating two treatments of skin wounds produced after percutaneous bone transfixation of the tibia. In six animals, cotton swabs embedded in 0.2 per cent iodine-alcohol were used to clean the areas of pin perforations. In five dogs, a 0.9 per cent sodium chloride solution, under approximate 30 psi pulse pressure, was used. In both cases, and treatments were carried out every three to four days, during four weeks. Clinical specimens were collected under anaerobic conditions, immediately before the treatments, and on days 3, 7, 14 and 28 after surgery. Samples were cultured in specific media in order to allow isolation of aerobic and anaerobic bacteria and yeast. Dogs treated with sodium chloride solution showed little purulent exudation, while dogs treated with iodine-alcohol presented dry skin wounds with minimum blood-serous to serous exudation. The microbiological evaluation revealed predominance of Staphylococcus spp, but no differences were observed between the two treatments. The results allowed to conclude that both methods are efficient for post-surgical treatments of bone percutaneous transfixation in dogs

Digestibilidade aparente em eqüídeos submetidos a três condutas de arraçoamento. I. Matéria seca, proteína bruta e energia bruta / Apparent digestibility in equidae fed hay and concentrate within schedule alternatives. I. Dry matter, crude protein and gross energy

O experimento foi realizado com o objetivo de comparar a digestibilidade da matéria seca (MS), da proteína bruta(PB) e da energia bruta(EB), em eqüinos, muares e asininos submetidos a três ordens de fornecimento de volumoso (VOL) e concentrado (CONC). Foi utilizado delineamento inteiramente ao acaso com nove tratamentos em esquema fatorial 3 x 3, com três repetiçöes para eqüinos e muares e duas para asininos. Os animais foram arraçoados na proporçäo de 2 por cento do peso vivo em MS (1 por cento de VOL e 1 por cento de CONC), utilizando-se feno de "coast-cross" (Cynodon dactylon x Cynodon nlemfluensis) como volumoso. As ordens de arraçoamento do VOL e CONC foram: A = VOL + CONC às 7h30min e 16h30min; B = CONC às 7h30min e 13h30min e VOL às 10h30min e 16h30min; C = VOL às 7h30min e 13h30min e CONC às 10h30min e 16h30min. Os coeficientes de digestäo médios foram determinados utilizando-se o método do óxido crômico (10g/animal/dia) divididos em dois fornecimentos. Eqüinos apresentaram melhor digestibilidade dos nutrientes analisados quando o volumoso foi oferecido antes ou misturado ao concentrado. Nos muares e asininos a digestibilidade dos nutrientes, exceçäo da PB nos muares, mostrou-se semelhante para as três ordens de fornecimento. Quando foi comparada a digestibilidade entre espécie dentro de cada arraçoamento, verificou-se que no tratamento A, asininos digeriram com melhor eficiência a EB da dieta, mas a digestibilidade da MS foi equivalente a dos eqüinos e da PB foi semelhante à dos muares. No tratamento B, asininos e muares tiveram melhores coeficientes de digestäo. Já no arraçoamento C, as três espécies apresentaram valores semelhantes para digestibilidade da MS e EB, mas asininos mostraram-se superiores na digestibilidade da PB

Digestibilidade aparente em eqüídeos submetidos a três condutas de arraçoamento. II - Fraçöes fibrosas / Apparent digestibility in equidae fed a hay and concentrate within schedule alternative. II - Fiber fractions

O experimento foi realizado com o objetivo de comparar a digestibilidade da fibra detergente neutro (FDN), fibra detergente ácido (FDA), celulose (CEL) e hemicelulose (HCEL) em eqüinos, muares e asininos submetidos a três ordens de fornecimento do volumoso (VOL) e concentrado (CONC). Foi utilizado delineamento inteiramente ao acaso com nove tratamentos em esquema fatorial 3 x 3 com três repetiçöes para eqüinos e muares e duas para asininos. Os animais foram arraçoados na proporçäo de 2 por cento de peso vivo em MS (1 por cento de VOL e 1 por cento de CONC) utilizando-se feno de "coast-cross" (Cynodon dactylon x Cynodon nlemfluensis) como volumoso. As ordens de arraçoamento de VOL e CONC foram: A = VOL + CONC às 7h30min e 16h30min; B = CONC às 7h30min e 13h30mun e VOL às 10h30min e 16h30min; C = VOL às 7h30min e 13h30mun e CONC às 10h30min e 16h30min. Os coeficientes de digestäo médios foram determinados pelo método de óxido crômico (10g/animal/dia) divididos em dois fornecimentos. Os resultados demonstraram que eqüinos apresentam melhor digestibilidade dos nutrientes analisados quando VOL é fornecido antes ou misturado ao CONC. Nos muares e asininos a digestibilidade dos nutrientes mostrou-se semelhante para as três ordens de VOL-CONC. Quando se comparou a digestibilidade entre espécies, dentro de cada tratamento, verificou-se que existem diferenças de aproveitamento da fraçäo fibrosa da dieta, entre a três espécies, dependendo da ordem de fornecimento do volumoso e do concentrado. Asininos foram superiores aos eqüinos em FDN (Trat. A e B), FDA e CEL (Trat. B), HCEL (Trat. A), mas näo diferiram desta espécie na digestibilidade de FDN e HCEL (Trat. C), FDA e CEL (Trat A e C). Asininos foram superiores aos muares em FDN, FDA, CEL e HCEL (Trat. A), CEL e HCEL (Trat. C). Muares apresentaram-se inferiores aos eqüinos na digestibilidade da FDN, CEL e HCEL (trat. C). Nos demais tratamentos näo houve diferença entre estas duas espécies